近日,生物工程学院、生物反应器工程全国重点实验室周胜敏课题组在Nucleic Acids Research发表题为“Dual-single-guide-RNA Strategy Improves CRISPR-Mediated Homology-Directed Repair in Aspergillus”的研究论文。该研究系统阐明了限制CRISPR 精准敲入效率的关键 DNA 修复机制,并提出了一种具有普适性的高效 HDR 设计策略,为基因编辑中插入位点依赖性强、目标片段难以高效敲入这一普遍问题,提供了可预测、可推广的解决方案。CRISPR-Cas9 是当前最重要的基因组编辑技术之一,可在sgRNA的引导下于基因组特定位点产生双链断裂,并借助细胞内 DNA 修复通路实现基因改造。对于外源序列的精准插入(knock-in),通常依赖同源定向修复(homology-directed repair, HDR)。然而,在真菌等体系中,HDR 效率常受到切割位点位置、插入片段长度以及修复通路竞争等多重因素制约,导致部分插入位点长期存在“难以敲入”的问题,缺乏清晰的机制解释和可预测的设计原则。
2026-02-12